[摘要] 目的 了解嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株在三氯生诱导下耐药性和外排泵SmeDEF表达的变化。 方法 选取2017年3～6月潍坊市人民医院细菌室培养的嗜麦芽窄食单胞菌分离株10株，比较三氯生诱导前后嗜麦芽窄食单胞菌的最小抑菌浓度（MIC）。监测三氯生诱导前后菌株外排泵smeD基因RT-PCR扩增后的表达水平。 结果 对抗生素敏感的10株菌泵抑制呈阳性或者阴性表现。其中6株菌经三氯生诱导后对左氧氟沙星的MIC值比诱导前高3～5个稀释度，加用泵抑制CCCP后，6株诱导后的菌株MIC值均有所降低。泵抑制剂阳性菌株抗生素过夜组和对数生长期添加组均明显高于无抗生素组的smeD的表达。 结论 嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株在三氯生诱导下对部分抗生素的耐药性有所提高，这与外排泵SmeDEF的表达有关。
[关键词] 三氯生；嗜麦芽窄食单胞菌；抗生素耐药性；外排泵；诱导
[中图分类号] R378 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）08（b）-0113-04
[Abstract] Objective To investigate the changes of Antibiotic resistance of Stenotrophomonas maltophilia and the expression of efflux pump SmeDEF in the induction of Triclosan. Methods From March to June in 2017， 10 strains of Stenotrophomonas maltophilia isolated from bacterial lab cultured in Weifang People′s Hospital were selected. The MIC of Stenotrophomonas maltophilia before and after the induction of Triclosan was compared and the repression level of the mRNA of efflux pump smeD was monitored by RT-PCR. Results The inhibition of 10 strains of bacteria pump sensitive to antibiotics was positive or negative. The levofloxacin MIC of 6 strains was 3-5 dilution higher than that before induction， and the MIC of 6 strains was reduced when the efflux pump inhibitor CCCP was used. The repression level of smeD of both pump inhibitor positive strains antibiotic overnight group and logarithmic growth addition group was significantly higher the no antibiotic group. Conclusion The resistance to antibiotics of Stenotrophomonas maltophilia clinical isolates induced by triclosan has increased， which is related to the expression of efflux pump SmeDEF.
[Key words] Tricolsan； Stenotrophomonas maltophilia； Antibiotic resistance； Efflux pump； Induction
三氯生，化学名称：2，4，4′-三氯-2′-羟基二苯基醚，一种非离子性的氯化苯酸化合物，广泛应用于牙膏、香皂、家庭清洁用品、表面清洁剂以及添加在不同材料中（无菌建筑中应用的纺织物和混凝土）[1-5]。三氯生是广泛应用的杀菌剂中的一种，在较低浓度下三氯生就可通过损害细胞膜杀死微生物，表现出抑菌性[6]。三氯生具有广谱抗菌性，但对革兰阴性菌和铜绿假单胞菌的抑菌活性低。杀菌剂用来防止微生物的定植在物体表面，但同时也可对周围环境中细菌的繁殖产生意料之外的影响[7-9]。嗜麦芽窄食单胞菌是广泛分布于环境中的一種专性需氧的非发酵革兰阴性杆菌，适于生存在潮湿的条件下，如：水、植物的根部、土壤。嗜麦芽窄食单胞菌为条件致病菌，可以定植于医用器材的表面，如：血液透析装置、呼吸机管道、导尿管、中心静脉置管等。随着抗生素的广泛使用以及介入治疗的开展，嗜麦芽窄食单胞菌感染越来越普遍，成为越来越重要的医院内感染病原体。嗜麦芽窄食单胞菌具有多种天然耐药机制，其中多重耐药（MDR）外排泵机制为最主要的一种，介导对多种抗生素的耐药，并且外排泵的表达受抗生素的诱导。不同的实验研究显示三氯生的耐药性也与MDR外排泵的表达有关[10-13]。
1 材料与方法
1.1 材料试剂与仪器
菌株来源：嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株，数量10株，来自潍坊市人民医院细菌室，分离自痰液、尿液。铜绿假单胞菌ATCC27853作药敏试验质控菌。
药品与试剂：左氧氟沙星购自潍坊市人民医院；三氯生、泵抑制剂CCCP，美国SIGMA公司生产。LB肉汤培养基、MH琼脂，上海生工公司产品。UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒，上海生工公司。
仪器：RT-PCR系统，Marker（DL-2000），上海生工公司。